Journal of Reproduction & Infertility

Journal of Reproduction & Infertility

Evaluation of relation between Ureaplasma Urealyticum infection with abortion

Authors
Masoumeh Alimagham 1
Masoud Motevasseli 1
Latif Gachkar 1
Manizheh Farajpour 2
Mohammad Niakan
1 Department of I nfectious Disease, Beheshti Medical Sciences university, Tehran, Iran
2 Microbiology Department, Faculty of Medicine, Shahed University, Tehran, Iran
Abstract
Since long time ago, abortion has been considered as one of the most important medical problems. Bacteria and infectious agents are one of its causes. Possible etiologic role of ureaplasma urealyticum in abortion has been suggested for years ago, but it has not been approved completely yet. Therefore, this study has been designed for approving of this hypothesis and prevention of spontaneous abortion. This study was a case control type of investigation done over women referred to private Gyn & Obs clinic, which had spontaneous abortion. Control group was selected among referred women who did not have any previous abortion. To investigate the presence of ureaplama urealyticum, vaginal and cervical culture was performed in both groups. Other interfering variable factors were also assessed and if there was any intervention factor in any one of two groups, sample was removed. After recording of results of study in questionnaire, central indexes were analyzed by K2, fisher exact test. 7 persons were eliminated from this study due to intervention factors, so, study was done over 34 patients as case (27 with one abortion and 7 with recurrent abortion) and 47 patients as control group. Mean age in case group was 26.3 4.6 years and in control group was 23.43.6 years. Positive vaginal and cervical culture for ureaplasma urealyticum in case group was 35% (12 persons) and in control group was 6% (3 persons) (P<0.0001). In patients with spontaneous recurrent abortion, positive culture for ureaplasma urealyticum was 71% (5 persons) and in patients with only one spontaneous abortion was 26% (7 persons) (P<0.034). In comparison with similar studies, positive culture of ureaplama urealyticum in patients of case group were a lot more in this study. Prevalence of ureaplama urealyticum in control group was 6% which is less than similar studies. Proportion of positive culture of ureaplasma urealyticum in patients with recurrent abortion was higher than those with only one abortion. Therefore, it is recommended that pregnant women specially those who have high risk pregnancy and also in women with history of abortion, should be examined for contamination with ureaplasma urealyticum. In case of positive results, proper treatment will reduce probable recurrent abortions.
Keywords
infections
Recurrent abortion
Spontaneous abortion
Ureaplasma urealyticum

مقدمه

از دیر باز سقط بعنوان یکی از معضلات مهم پزشکی در جوامع به حساب می‏آمده است. این معضل در جوامع کم درآمد بیشتر نمایان‏گر شده و بعنوان یکی از عوامل شکست خانواده به حساب می‏آید. زیرا مادر خانواده یکی از منابع دخیل در اقتصاد خانواده است که در پی حاملگی و سقط، مدت نسبتاً طولانی نیاز به استراحت داشته و نه تنها درآمدی کسب ننموده بلکه هزینه زیادی را از بابت رسیدگی و مخارج درمانی به خود اختصاص می دهد. از نظر روحی نیز سقط یک ضربه روانی شدید برای خانواده و علی الخصوص مادر به حساب می‏آید.

از سالها پیش پزشکان به نقش عوامل میکروبی در سقط جنین پی برده‏اند و تلاشهای زیادی در این رابطه انجام و به نتایج شایان توجهی دست یافتنه‏اند. ارتباط سقط با عوامل متعددی از جمله توکسوپلاسما، بروسلا، لیستریامونوسیتوژن، سرخجه، سیفلیس و گاردنرلا با دلایل کاملاً موجه و تحقیقات کاملاً روشنی به اثبات رسیده است (1).

تعدادی از بیماریهای غیر عفونی از جمله اختلالات غددی مانند بیماریهای تیروئید نیز در ایجاد سقط دخیل می‏باشند (1). در مورد ارتباط اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم با سقط بررسی‏های مختلفی انجام گرفته که عمدتاً به صورت گزارشهای موردی مطرح شده‏اند (1). یکی از عللی که اظهار نظر در این رابطه را مشکل نموده است درصد قابل توجهی از آلودگی به اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم در خانمهای بالغ می‏باشد (2).

در یک مطالعه که اوره‏آپلاسما در دو گروه مورد و شاهد از نظر سروتیپ بررسی گردید، هیچگونه اختلافی بین آنها وجود نداشت (3). در مطالعه دیگری پاتوژنز اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم در سقط زودرس خودبخودی چیزی غیر از التهاب حاد پیشنهاد گردید (4).

در این تحقیق با مراجعه به مطب خصوصی پزشکان کلیه خانمهایی که سقط داشته‏اند وجهت ورود به طرح اعلام آمادگی کرده بودند از نظر وجود اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم با گروه شاهد (افراد همخوان شده با گروه مورد از نظر متغیرهای مداخله‏گر که فاقد سابقه سقط بودند) مقایسه شدند.

نتایج این تحقیق شاید بتواند روشن کننده نقش اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم در سقط باشد. با توجه به اهمیت موضوع، ارتباط یا عدم ارتباط منطقی هر دو می‏تواند نقش مهم در هدایت سیستم بهداشتی و درمانی کشور و راهنمای پزشکانی باشد که در این ارتباط بیماران را بررسی می‏نمایند و در صورت عدم ارتباط موضوع نیز پزشکان مربوطه به پرهیز از درخواست آزمایشات غیر لازم توصیه و زحمات و مخارج آزمایشگاهی کمتری به بیماران تحمیل می‏گردد.

مواد و روشها:

این بررسی از نوع تحلیلی، موردی - شاهدی بوده که با استفاده از تکنیک مشاهده- مصاحبه‏ای انجام گرفت. برای اجرای این تحقیق، پس از کسب مجوزهای لازم کلیه خانمهای مراجعه کننده به مطب خصوصی پزشکان زنان و زایمان که دچار سقط خودبخودی ( بنا به تشخیص متخصص بیماریهای زنان) شده بودند در صورت اعلام آمادگی جهت ورود به طرح و فقدان متغیرهای مداخله‏گر مورد بررسی قرار گرفتند.برای گروه شاهد نیز از میان همان مراجعه کنندگان به مطب‏های پزشکان، افرادی که سابقة سقط نداشته، در صورت آمادگی جهت ورود به طرح مورد بررسی قرار گرفتند. از دو گروه فوق نمونه برداری واژن و سرویکس انجام گرفت. فرد انجام دهنده کشت از وضعیت افراد از نظر سقط خودبخودی اطلاعی نداشت. نتایج جمع‏آوری و به جداول اصلی تجزیه و تحلیل آماری انتقال داده شد و بر اساس آمار تحلیلی و با استفاده از تست آماری Ficher exact test, student t-test وchi square مورد بررسی قرار گرفت.

در آزمایشگاه: برای جدا کردن اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم از محیط کشت Urea broth و Urea Agar استفاده گردید. در محیط Urea broth که حاوی پپتون، نمک، فنل رد (بعنوان اندیکاتور)، آب مقطر، بافر، اوره، سرم اسب، پنی‏سیلین و لینکومایسین‌ باکتری رشد کرده و باعث تغییر رنگ محیط از قرمز به زرد می‏شود. این تغییر رنگ به دلیل هیدرولیز اوره توسط باکتری و اسیدی شدن محیط بود که برای این باکتری تست تشخیصی است (6-5).

پس از بررسی و حصول نتایج کشت نمونه‏های مبتلا به سقط و نمونه‏های شاهد، برای تائید دقیقتر رشد باکتری از محیطUrea Agar استفاده گردید که یک محیط کشت جامد حاوی اوره می‏باشد. در این محیط کشت اختصاصی کلنی‏های بسیار کوچک اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم پس از چهار تا پنج روز با کمک میکروسکوپ قابل رویت می‏باشد (6-5).

نتایج

در این تحقیق 47 نفر زن فاقد سابقه سقط و 41 نفر دارای سابقه سقط جنین مورد بررسی قرار گرفتند. از گروه دارای سابقة سقط جنین 7 نفر به علت داشتن نشانه های آزمایشگاهی از عفونت لیستریایی ( 2 نفر) روبلا (4 نفر) و توکسوپلاسما (1 نفر) از بررسی حذف گردیدند که در نهایت 34 نفر در گروه مورد که همگی فاقد نشانه هایی از درگیری با گاردنرلا، بروسلا، سیفلیس، لیستریا، توکسوپلاسما و روبلا بودند. 47 نفر در گروه شاهد مورد بررسی قرار گرفتند. جدول 1، توزیع گروههای سنی مختلف را در دو گروه مورد مطالعه نشان می‎‏دهد. افراد گروه مورد دارای میانگین سنی 6/43/26 سال و میانگین سنی در گروه شاهد 6/34/23 سال بودند.

بررسی از نظر درگیری واژن و سرویکس با اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم بوسیله کشت مخاط حاصل از این نواحی انجام گردید. جدول 2 نشان می‏دهد که 35% (12نفر) از گروه مورد و 6% ( 3 نفر) از گروه شاهد از نظر اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم دارای کشت مثبت بودند. با استفاده از آزمون مجذور K مشخص گردید که چنین اختلافی به لحاظ آماری معنی‏دار می‏باشد (0001/0p<).

بحث:

بر اساس تحقیق انجام شده، کشت مثبت اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم از واژن خانمهای با سابقه سقط اخیر بمراتب بیشتر از خانمهای بدون سابقه سقط در جامعه می‏باشد که این اختلاف از لحاظ آماری کاملاً معنی‏دار می‏باشد (0001/0p<). این تفاوت در سقط‏های مکرر نسبت به سقط منفرد نیز معنی‏دار می‏باشد (034/0p<).

نتایج ما با تحقیقات Naessens و همکاران مطابقت دارد (2). در مطالعة Naessens و همکاران در گروه مبتلا به سقط میزان سقط خودبخودی 3/53%، ولی در مطالعه ما 35% کشت‏های سرویکس و واژن از نظر اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم مثبت بود. علاوه بر این در مطالعه Naessens و همکاران در گروه مبتلا به سقط مکرر میزان کشت مثبت اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم 5/64% و در مطالعه ما 71% بوده که کاملاً با هم مطابقت دارد. در ارتباط با افراد شاهد مطالعه که می‏تواند نمادی از شروع اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم در خانمهای سنین باروری باشد در مطالعه اخیر 6% افراد مبتلا بودند، اما در مطالعه Naessens و همکاران این میزان به 6/42% می‏رسد، که ممکن است اختلاف حاصله به دلایل متفاوتی باشد:

1- کلونیزاسیون اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم با وضعیت اجتماعی – اقتصادی (Socieconomic status) افراد مرتبط است. در یک مطالعه در بوستون میزان کلونیزاسیون اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم در مراجعه کنندگان به کلینیک‏های خصوصی زنان 20% در مقایسه با مراجعه کنندگان به بیمارستانهای شهری که 50% بوده است (7). در این مطالعه نیز بیماران ما از سرویس خصوصی انتخاب شده بودند.

2- کلونیزاسیون اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم در بین سیاهپوستان (1) خیلی بیشتر از سفید پوستان بوده است، پس ممکن است عوامل نژادی نیز در آن نقش داشته باشند. افراد مورد مطالعه ما همگی سفید پوست بوده‏اند.

3- کلونیزاسیون اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم با توجه به تعداد شریکهای جنسی افزایش پیدا می‏کند (1) که با توجه به فرهنگ جامعه مورد مطالعه ما این نکته نیز میتواند توجیه کننده علت اختلاف در میزان کلونیزاسیون باشد.

4- شیوع بالاتر STD در جامعه مورد مطالعه Naessens (2) و همکاران نیز ممکن است توجیه کنندة اختلاف حاصله در میزان کلونیزاسیون اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم باشد. نتایج آماری مطالعات کشورهای مختلف با مطالعه ما اثبات می‏نماید اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم در بروز سقط خودبخودی و سقط مکرر میتواند نقش اتیولوژیک داشته باشد.

در مطالعه‏ای که توسطRen و همکاران انجام گرفت (8) انجام PCR روی بافت سقط شده از نظر اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم در 3/33% از موارد سقط خودبخودی مثبت گردیده که این میزان با مطالعه ما (35% بر اساس نتایج کشت) قابل مقایسه می‏باشد.

در مطالعه دیگر توسطCheng و همکاران (9)، کشت بافتهای سقط شده و موکوس سرویکال تهیه شده در گروه سقط خودبخودی 50% و در گروه خانمهای سالم 10% از نظر اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم مثبت بوده، که قرابت زیادی با نتایج مطالعه ما دارد.

در مطالعه Joste و همکاران ( 4) کشت اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم در گروه سقط خودبخودی زودرس 26% و در گروه سقط انتخابی هیچ مورد مثبتی مشاهده نگردید، در نتیجه بنظر می‏رسد اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم با رشد جنین تداخل ایجاد کرده و سبب مرگ آن می‏گردد (2).

ظاهراً عفونت جفت تنها مکانیسم ایجاد آسیب (پاتوژنز) توسط اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم نبوده و احتمالاً عفونت به طور مستقیم باعث مرگ جنین می‏گردد(2).

Tafari و همکارانش نشان دادند که در 21 نوزاد مرده بدنیا آمده، اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم تنها ارگانیسمی بود که از ریة این نوزادان جدا گردید، به همین دلیل نظریة پنومونیت مادرزادی و تهاجم اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم به جنین از مکانیسمهای مطرح در پاتوژنز بیماری است (10). متاسفانه در تحقیق ما، امکان بررسی جفت و مایع آمینوتیک و جنین از نظر کشت، سرولوژی، PCR و بافت شناسی برای وجود اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم و سایر میکروارگانیسمهای مورد نظر امکان پذیر نبوده است.

یافته‏های فوق تائید می‏کند در سقطهای مکرری که درصد کلونیزاسیون واژن بسیار بالا می‏باشد احتمالاً بایستی در بخش فوقانی دستگاه و رحم نیز این عامل وجود داشته است.

با توجه به وجود 35% آلودگی به اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم در گروه دارای سقط جنین در افراد مورد مطالعه، در نهایت می‏توان توصیه نمود که خانمهای حامله که در معرض خطر سقط جنین، علی الخصوص کسانی که سابقه سقط دارند بایستی از نظر وجود اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم مورد بررسی قرارگرفته تا احتمال خطر سقط خودبخودی کاهش یابد. چه بسا بهتر است این بررسی قبل از حاملگی انجام گیرد. در خانمهای دچار سقط مکرر نیز کشت و پیگیری بررسی از نظر اوره‏آپلاسما اوره‏آلیتیکوم و درمان مقتضی راهکاری مناسبی خواهد بود.

تشکر و قدردانی

از کلیه همکاران آزمایشگاه پاتوبیولوژی مرکزی و آزمایشگاه دانش که در اجرای این طرح با ما همکاری داشتند، تشکر و قدردانی می‏گردد.

  1. Taylor-Robinson D. Ureaplasma, urealyticum, mycoplasma hominis, and mycoplasma genitalium. Mandel, Douglas, and Bennet, Principles and practice of infections Disease. 5th Edition.2000; 173: 2027- 31.
  2. Naessens A., Foulon W., Cammu H., et al. Epidemiology and pathogenesis of ureaplasma ureaiyticum in spontaneous abortion and early preterm labor. Acta Obs Gyn scand. 1987; 66:513-6.
  3. Robertson J.A., Honore L.H., Stemke G.W. Serotypes of ureaplasma ureaiyticum in microbiology. 1990; Appendix A: A31-2.spontaneous abortion. Pediatric infection disease. 1986; 5(2):270.
  4. Nancy E., Kundsin R.B., Genest D.R., et al. Histology and ureaplasma ureaiyticum culture in 63 cases of first trimester abortion. Am J Clin pathol. 1994; 102(6):729.
  5. Woods G.L., Walker D.H. Chlamidial, rickettsial and mycoplasmal infection. John Bernard Henry. Clinical diagnosis and management by lab. Methods. 1996; 97:1128-9.
  6. Baron E.J., Fingold S.M., Bailey & Scatt’s. Appendix A., Formulas and preparation of culture media and reagents. Diagnostic
  7. Mc Comack W.M., Rosner B., Lee Y.H. Colonization with genital mycoplasma in woman. Am J Epidemiology 1973; 97:240.
  8. Ren P., Yan X., Yang Y. Detection of Chlamidia Trachomatis and Ureaplasma ureaiyticum from aborted tissues by P.C.R. Hau Ju chan ko jsa chih. 1997; 32 (4): 214-6.
  9. Cheng S.Y., Ling T.S., FU Q.H., Ureaplasma ureaiyticum infection spontaneus abortion. Chung Hua Ju Chan Ko Jsa Chih. 1994; 29 (4): 230 –1, 254.
  10. Tafari N., Ross S., Naeye R.L. Mycoplasma T- strain and perinatal death. Lancet. 1976; 1:108-9.
Journal of Reproduction & Infertility
Volume 2, Issue 2
Spring 2001
Pages 29-34